摘要
目的探讨黑果枸杞多糖对HaCaT细胞光损伤的预防作用及机制。方法采用超声辅助水提法提取柴达木黑果枸杞中的多糖成分。体外培养的HaCaT细胞分为3组, 对照组:正常培养, 不做其他处理;中波紫外线(UVB)组:30 mJ/cm2 UVB照射;实验组:30 mJ/cm2 UVB照射前6 h加入2 g/L黑果枸杞多糖溶液。照射1 h后继续培养12 h, 倒置显微镜观察细胞形态, MTS法测定细胞增殖, 流式细胞仪测定细胞凋亡率, 酶标法检测细胞丙二醛和谷胱甘肽过氧化物酶含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力, ELISA法检测上清液和细胞中白细胞介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果与对照组相比, UVB组细胞形态模糊不清, 出现死亡漂浮现象;实验组细胞肿胀, 但形态尚清楚。MTS结果显示, 3组间细胞增殖吸光度值差异有统计学意义(F= 48.88, P < 0.01), 其中UVB组(1.72 ± 0.12)显著低于对照组(2.34 ± 0.11), 实验组(2.11 ± 0.10)又显著高于UVB组, 差异均有统计学意义(P < 0. 05)。UVB组细胞凋亡率(82.41% ± 2.49%)显著高于对照组(3.98% ± 0.19%)和实验组(22.79% ± 0.97%), 实验组细胞凋亡率明显高于对照组, 各组间比较差异均有统计学意义(均P < 0.05)。UVB组与对照组比较, 丙二醛含量明显上升, SOD活性、谷胱甘肽过氧化物酶含量、CAT活性明显下降(均P < 0.05)。同时, UVB组较对照组上清液中IL-1和TNF-α含量及细胞中TNF-α含量均明显升高(均P < 0.05), 但细胞中IL-1差异无统计学意义(P > 0. 05)。结论黑果枸杞多糖对HaCaT细胞的光损伤有保护作用, 其保护机制可能与减少细胞炎症物质的合成和分泌及减少自由基有关。
- 单位