非洲猪瘟病毒p72蛋白的原核表达和多克隆抗体制备

作者：陈金凤; 乐伟; 何永; 吴丽琴; 贾宝玉; 邓小淇; 胡睿铭; 黄冬艳; 宋德平; 邬向东; 吴琼; 唐玉新; 丁珍^*

来源：江西农业大学学报, 2021, 43(01): 153-160.

DOI：10.13836/j.jjau.2021017

• 非洲猪瘟病毒
• p72
• 原核表达
• 多克隆抗体

【目的】非洲猪瘟(african swine fever,ASF)是一种以猪急性发病、高死亡率为典型特征的病毒病,其病原非洲猪瘟病毒(ASF virus,ASFV)在中国的暴发给中国养猪业造成重大损失。p72蛋白是ASFV的主要衣壳蛋白,能够有效诱导机体产生特异性抗体,常被利用于检测试剂盒的备成。【方法】构建了p72全长(pET-28aASFV-p72)及1-171aa截短突变体(pET-28a-ASFV-p72-(1-171))原核表达质粒,通过E. coli原核表达系统表达并纯化了p72全长及1-171aa融合蛋白。该2种蛋白经过4次免疫日本大耳白Balb/C兔后,获得效价皆为大于1∶819 200的多抗血清。【结果】通过间接免疫荧光实验和Western blot检测2种多抗均能与真核表达的p72蛋白发生特异性反应。【结论】制备的针对p72多克隆抗体为后续诊断试剂盒的研发提供依据。

• 单位
  江西农业大学