细粒棘球绦虫重组BCG-EgG1Y162菌株的构建和表达

作者:祖力皮也·吐尔逊; 德力夏提·依米提; 曹春宝; 马海梅; 李玉娇; 周晓涛; 朱明; 马秀敏; 温浩; 丁剑冰
来源:中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, (02): 110-113.

摘要

目的构建和表达细粒棘球绦虫重组卡介苗(BCG)菌株rBCG-EgG1Y162。方法通过基因工程技术将细粒棘球绦虫抗原EgG1Y162的编码基因与大肠埃希菌(E.coli)-分枝杆菌穿梭表达质粒载体pMV361重组,并转化E.coli后进行扩增。重组质粒pMV-EgG1Y162经PCR和双酶切鉴定后,进行测序。将鉴定正确的rpMV-EgG1Y162通过电穿孔技术转化至感受态BCG菌株中,构建rBCG-EgG1Y162。经PCR和双酶切鉴定正确后,扩增培养2周,并于45℃放置30 min,诱导目的蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白表达情况,并以兔抗原核表达重组...