摘要
目的通过探讨螯合剂与金属硫蛋白(MT)竞争结合铀(U)(VI)的作用,建立铀促排螯合剂体外筛选的新方法。方法采用竞争ELISA法,96孔酶标板经MT抗原包被、U(VI)或Zn2+预处理、螯合剂(CBMIDA-CaNa2、BPCBG和DTPA-CaNa3)处理、MT抗体免疫结合、HRP偶联二抗结合及OPD显色反应后,在波长490 nm处检测吸光度值以评价螯合剂与MT竞争结合U(VI)、Zn2+的能力。结果本反应体系的吸光度值随MT质量浓度和MT抗体浓度增加而增加,其中最佳MT抗原包被浓度和MT抗体浓度均为2μg/mL。与Zn2+的作用相似,U(VI)亦可使反应体系的吸光度值随其浓度增加而降低,其中最佳U(VI)和Zn2+浓度均为300μg/mL。加入CBMIDA-CaNa2和BPCBG则能明显提高U(VI)处理体系的吸光度值,CBMIDA-CaNa2的作用强于BPCBG,而DTPA-CaNa3则无明显作用;各螯合剂与MT竞争结合U(VI)能力的强弱顺序与以往细胞和动物U(VI)促排实验的结果相吻合。这3种螯合剂对Zn2+处理体系的吸光度值均无明显影响。结论 CBMIDA-CaNa2和BPCBG能有效竞争结合于MT上的U(VI),DTPA-CaNa3无明显作用,竞争ELISA法可作为体外筛选U(VI)促排螯合剂的方法,具有简便、快速和高通量的优势。
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单位放射医学研究所; 复旦大学