鼠抗鸡膜联蛋白A2多克隆抗体的制备及应用

作者：高洪波; 袁超; 周磊; 韩一帆; 段志强^*

来源：扬州大学学报（农业与生命科学版）, 2021, 42(04): 23-28.

DOI：10.16872/j.cnki.1671-4652.2021.04.005

• 鸡
• 膜联蛋白A2
• 多克隆抗体
• 原核表达

为制备鼠抗鸡膜联蛋白A2 (ANXA2)多克隆抗体,检测ANXA2蛋白在鸡不同组织中的表达情况,先构建鸡ANXA2基因的重组原核表达载体pET-32a-ANXA2,将其转化入大肠埃希菌中进行诱导表达;采用切胶纯化和切胶免疫小鼠的方法制备鸡ANXA2多克隆抗体,然后利用该抗体检测ANXA2蛋白在4周龄SPF鸡不同组织中的表达情况。结果表明:鸡ANXA2重组蛋白His-ANXA2在IPTG终浓度为0.1 mmol·L-1、诱导时间为5 h的条件下表达量高。通过切胶纯化和切胶免疫方法获得了具有较高效价和特异性的鸡ANXA2蛋白鼠多克隆抗体。组织表达检测结果显示,ANXA2蛋白在鸡法氏囊、胸腺、十二指肠、肾脏、脑、腿肌和心脏中有表达,而在肝脏、脾脏、肺脏、腺胃和胰腺中未检测到表达。这一研究获得的鼠抗鸡ANXA2蛋白多克隆抗体为后续研究鸡相关病毒的复制和致病机制奠定了基础。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院