心肌特异性表达人KCNE4转基因小鼠模型的建立

作者：杨奕清; 刘懿; 董雄剑; 林捷; 陈义汉

来源：同济大学学报(医学版), 2006, (06): 1-5.

• KCNE4
• 转基因
• 心律失常
• 小鼠

目的本研究旨在建立心肌特异性表达人KCNE4(hKCNE4)基因小鼠模型,为探索hKCNE4基因对特定类型心房颤动的防治作用奠定基础。方法通过RT-PCR克隆hKCNE4基因,使用核酸内切酶和连接酶构建hKC- NE4基因心肌特异性表达载体hKCNE4-α-MHC-Clone26,经过酶切鉴定、序列分析证实无误后用BamHI酶切获得转基因表达元件hKCNE4-α-MHC-hGH pA。将hKCNE4-α-MHC-hGH pA显微注入小鼠受精卵雄性原核,并将有活力的受精卵移植到代孕小鼠的输卵管。PCR鉴定出代孕鼠所生小鼠中转基因阳性原代(G0)小鼠,运用RT-PCR-测序技术对阳性G0小鼠与野生型小鼠交配所生的一代(G1)小鼠进行检测以识别出表达转基因的阳性小鼠。结果成功克隆了hKCNE4基因,正确构建了hKCNE4基因心肌特异性表达载体hKCNE4-α-MHC-Clone 26。代孕鼠共生产86只仔鼠,9只转基因阳性,2只(分别称其为Line A和Line B)转基因在心脏中高表达。对Line A和Line B的阳性后代进行初步表型分析发现其生长发育良好,繁殖力正常,体表心电图无明显异常。结论成功建立心肌特异性表达hKCNE4转基因小鼠模型,为进一步研究hKCNE4基因对特定类型心房颤动的防治作用提供了一种工具。

• 单位
  同济大学; 同济医院