热休克蛋白60对热应激H9C2心肌细胞凋亡的影响及机理研究

作者：程艳芬; 鲍恩东^*; 耿雪冉; 徐丽婧; 罗华; 孟俊龙

来源：山西农业大学学报(自然科学版), 2020, 40(02): 72-78.

DOI：10.13842/j.cnki.issn1671-8151.201904030

• Hsp60
• 热应激
• 心肌细胞
• 凋亡

[目的]观察热应激过程中胞外热休克蛋白60(Hsp60)对H9C2大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。[方法]将H9C2心肌细胞随机分为热应激0h、1h、2h和4h四组,对其进行相应时间的热应激处理,通过流式细胞仪检测H9C2心肌细胞的凋亡情况;将H9C2心肌细胞随机分为对照组和热应激组,热应激组心肌细胞进行2h的热应激处理,通过ELISA方法检测细胞培养上清液中Hsp60的含量;将H9C2心肌细胞随机分为anti-Hsp60(-)和anti-Hsp60(+)两组,在培养基中分别加入等量的山羊抗鼠IgG和Hsp60抗体,0.5h后,对其进行2h的热应激处理,通过流式细胞术和荧光定量PCR检测H9C2心肌细胞的凋亡情况;在anti-Hsp60(-)和anti-Hsp60(+)的基础上,将p38、ERK和JNK的抑制剂SB203580、PD98059、SP600125分别加入细胞培养上清液,通过Western Blotting技术检测H9C2心肌细胞p-p38/p38,p-ERK/ERK,p-JNK/JNK的变化。[结果]随着热应激时间的延长,H9C2心肌细胞的凋亡率显著升高;热应激导致细胞培养上清液中Hsp60显著升高;与anti-Hsp60(-)组相比,anti-Hsp60(+)组心肌细胞的凋亡率显著升高,p-ERK/ERK比值显著降低,p-JNK/JNK比值显著升高。加入SB203580、PD98059、SP600125后,anti-Hsp60(+)组细胞凋亡率分别表现为无显著差异,显著降低,显著升高。[结论]细胞外微量的Hsp60可缓解热应激导致的H9C2大鼠心肌细胞凋亡,其机制与ERK、JNK的激活有关。

• 单位
  山西农业大学