龙胆泻肝汤对葡萄膜炎大鼠Th17/Treg动态免疫平衡的调控作用

作者：殷学伟; 周梦贤; 崔艳艳; 李土玲; 毕宏生; 郭大东^*

来源：时珍国医国药, 2022, 33(05): 1098-1102.

• 龙胆泻肝汤
• 实验性自身免疫性葡萄膜炎
• Th17/Treg
• +/CD8+" name="keyword">CD4+/CD8+
• IL-10
• IL-17

目的 观察龙胆泻肝汤(Longdan Xiegan Decoction, LXD)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis, EAU)大鼠Th细胞表达水平的动态影响，探讨LXD对EAU大鼠Th17/Treg免疫平衡的调控作用。方法 随机将雌性Lewis大鼠分为正常对照组、EAU模型组和LXD干预组。首先，将EAU模型组和LXD干预组大鼠构建为EAU模型，随后每天对LXD干预组大鼠进行LXD灌胃干预，EAU模型组采用相同体积的PBS缓冲液灌胃。免疫后12d,观察各组大鼠的眼部炎症情况和组织病理学变化；实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction, Q-PCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测三组大鼠免疫后6、9、12、15、18d的脾脏、淋巴结及眼组织中IL-10和IL-17 mRNA及蛋白的动态表达；此外，流式检测各组织中CD4+、CD8+、Th17、Treg细胞的表达水平，观察CD4+/CD8+、Th17/Treg比例的变化趋势。结果 免疫后12d, EAU模型组大鼠的眼部表现出严重的炎症表现(虹膜血管扩张充血严重、瞳孔膜闭、积脓)。相比于EAU模型组，LXD干预组大鼠的眼部炎症明显较轻(虹膜血管轻度充血);病理观察显示，LXD可明显保护EAU大鼠的眼部组织结构；相比于正常对照组，EAU组和LXD组大鼠各组织中IL-10、IL-17 mRNA和蛋白水平从第6天开始逐升高，第12天达到峰值，随后逐渐降低(均P>0.05)。但相比于EAU模型组，LXD组免疫后不同时间点各组织中IL-10水平均显著升高，IL-17水平显著降低(均P>0.05);流式检测发现，在免疫后6、9、12、15和18天，EAU模型组大鼠各组织中CD4+/CD8+、Th17/Treg比例均高于正常对照组，呈现不均衡表达；经LXD干预治疗后，LXD组大鼠各组织中CD4+、Th17细胞水平表达下降，CD8+、Treg水平表达升高，两者比例逐渐恢复均衡。结论 LXD可显著促进EAU大鼠的眼部炎症的消退，进而发挥免疫抗炎作用。此外，LXD可明显减少CD4+、Th17细胞水平以及IL-17水平的表达，提高CD8+、Treg细胞水平以及IL-10水平，从而发挥对Th17/Treg免疫平衡的调控作用。

• 单位
  山东中医药大学; 聊城市人民医院