硝酸镧诱导SK-N-SH细胞氧化应激和自噬的作用

作者：来丽叶; 智翠娜; 傅娟玲; 赵鹏; 姚碧云^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2020, 34(10): 750-755.

• 硝酸镧
• SK-N-SH细胞
• 氧化应激
• 线粒体膜电位
• 自噬

目的研究硝酸镧〔La(NO3)3〕在引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞毒性中氧化应激和自噬的作用机制。方法 La(NO3)30.125,0.25,0.5,1.0,2.0和4.0 mmol·L-1处理SK-N-SH细胞24 h,MTT法检测细胞存活率。La(NO3)3 0.5,1.0和2.0 mmol·L-1处理细胞24 h,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位,激光共聚焦显微镜检测细胞自噬体数量,Western印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值,P62,Parkin和PTEN诱导假定激酶1(PINK1)蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)3≤0.5 mmol·L-1对细胞存活率无显著影响,La(NO3)31.0,2.0和4.0 mmol·L-1组细胞存活率均显著降低(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5 mmol·L-1组细胞ROS含量无明显差异,La(NO3)31.0和2.0 mmol·L-1组细胞ROS含量均显著升高(P<0.05,P<0.01),La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L-1组线粒体膜电位均显著降低(P<0.05,P<0.01)。激光共聚焦结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L-1组细胞自噬体数量均显著增加(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L-1组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、Parkin和PINK1蛋白表达均显著升高(P<0.05),P62蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论La(NO3)3可诱导SK-N-SH细胞发生氧化应激、线粒体功能障碍,同时可诱导SK-N-SH细胞产生细胞自噬和线粒体自噬。

• 单位
  北京大学; 公共卫生学院