摘要
为探索趋化因子CCL26 C端截短肽(26C)的生物学活性,本研究利用倍比稀释法测定了不同浓度的26C对耐多粘菌素B(PxB)大肠杆菌K1的浓度-杀菌曲线;利用外膜通透性实验(NPN)测定26C对细菌外膜的破坏效果,利用透射电镜观察26C作用于细菌细胞膜后对菌体及内容物的影响;利用ATP泄露实验测定26C对细菌内容物泄露的影响;本研究进一步利用结晶紫染色法和激光共聚焦测定26C对铜绿假单胞菌生物被膜(bioflim,BF)形成的影响;利用溶血活性实验检测26C对红细胞的溶血活性,并利用MTT法测定其对角质细胞HaCaT的细胞毒性。结果显示,26C在不同浓度下对K1均有良好的杀菌活性,4 μmol/L时可以完全杀灭细菌,使活菌数降低4 log;低浓度的26C(1 μmol/L)即可显著降低BF的形成;26C(2 μmol/L)通过破坏细菌细胞膜并导致细菌内容物泄露而杀死细菌;其在高达128 μmol/L的浓度下仍无溶血活性,且在1~16 μmol/L浓度下对HaCaT无细胞毒性,32~64 μmol/L时具有较低的细胞毒性。本研究首次证实了CCL26 C端截短肽26C具有良好的抗菌活性和抗生物被膜能力,又无溶血活性和细胞毒性,为其作为治疗耐药菌的新型药物的临床研究和应用提供参考。
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单位兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所