VHL基因沉默对MPP+所致帕金森病细胞模型的影响

作者：梁潇; 杨倩华; 刘君怡; 刘睿雅; 王祉文; 周岳茜; 陈松^*

来源：药物生物技术, 2022, 29(05): 454-459.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.20220503

• VHL基因沉默
• 慢病毒
• 帕金森病
• +" name="keyword">MPP+
• SH-SY5Y细胞
• 细胞凋亡

文章研究von Hippel-Lindau(VHL)基因沉默对帕金森病(Parkinson′s disease, PD)神经细胞模型的影响。采用VHL-shRNA慢病毒载体转染至SH-SY5Y细胞，Western Blot法筛选干扰效率最高的VHL-shRNA,并通过shRNA慢病毒感染及嘌呤霉素筛选构建VHL基因沉默细胞；Western Blot和RT-qPCR法检测VHL基因沉默细胞中VHL蛋白表达及其mRNA水平；细胞分化后采用MPP+诱导细胞损伤，MTT法检测VHL基因沉默对MPP+致神经细胞损伤模型细胞活力的影响；Hoechst/PI双染法检测VHL基因沉默后神经细胞损伤模型死亡情况；Western Blot检测VHL基因沉默对MPP+致神经细胞损伤模型中PD病理相关蛋白TH及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平的影响。结果显示，与对照组相比，VHL基因沉默细胞中VHL蛋白表达(P<0.01)及其mRNA(P<0.001)水平显著下降；与PD细胞模型组相比，VHL基因沉默可以显著提高MPP+所致神经细胞损伤模型的细胞活力(P<0.01),减少细胞死亡情况；与模型组相比，VHL基因沉默可明显提高MPP+所致损伤模型细胞中TH的表达水平(P<0.01),同时显著缓解细胞凋亡相关蛋白水平的异常(P<0.01)。以上结果提示VHL基因沉默可能通过影响凋亡相关通路从而缓解MPP+导致的神经细胞损伤；VHL可能具有作为PD新型治疗靶点的潜力，为PD的治疗研究提供了新思路。

• 单位
  中国药科大学