致猪水肿病大肠杆菌鄂E株菌毛F18基因FedF亚基的克隆、表达及其生物学特性

作者：刘国平; 郭爱珍; 吴斌; 钱平; 刘正飞; 陈焕春

来源：中国兽医学报, 2008, (05): 479-484.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2008.05.029

• 大肠杆菌
• FedF
• F18基因
• 克隆
• 原核表达 E.coli
• FedF gene
• F18 gene
• cloning
• prokaryotic expression

以致猪水肿病大肠杆菌鄂E株为模板,通过PCR的方法扩增大肠杆菌菌毛F18主要亚基FedF的全长及去信号肽亚基因FedFs,扩增片段分别为1000、900 bp。将纯化的扩增产物克隆到pMD18-T中,通过酶切鉴定和序列分析表明,含SacⅠ及HindⅢ酶切位点的基因全长为967 bp,鄂E株FedF基因编码区全长903 bp,编码301个氨基酸,碱基序列同标准株107/86的同源性为100%。与菌毛AF/R1相比,编码的蛋白质没有同源性。利用pGEX-KG分别构建表达载体,SDS-PAGE检测表明FedFc/pGEX-KG无表达带,FedFs/pGEX-KG则有约58 000的特异性表达带;We...

• 单位
  长江大学; 动物科学学院; 农业微生物学国家重点实验室