基于CRISPR/Cas12b的乳粉中克罗诺杆菌属检测

作者：张懿翔; 张清平; 李林显; 王亮; 杨捷琳; 刘洋^*

来源：中国食品学报, 2022, 22(06): 267-275.

DOI：10.16429/j.1009-7848.2022.06.028

• CRISPR
• Cas12b
• 克罗诺杆菌属
• 检测

目的：开发一种基于CRISPR/Cas12b的克罗诺杆菌属分子检测方法。方法：以克罗诺杆菌菌属特异性基因序列为候选区域，针对区域设计扩增引物和向导RNA靶向序列，对其进行条件优化、特异性检测、反应体系优化，并用人工污染样品对体系的灵敏度、重复性进行验证。结果：该方法的特异性很好，方法的灵敏度达0.01 ng/μL，在人工污染样品中可检测到初始菌量<10 CFU/g的样品，方法检出限<10 CFU/100 g。对市售的51份乳粉样品进行检测，结果与传统国标方法一致。结论：建立的CRISPR/Cas12b方法可用于乳粉中克罗诺杆菌属的快速检测。

• 单位
  上海市质量监督检验技术研究院