含NPTⅡ标记基因的转基因抗虫棉室内快速鉴定方法

作者：王彦霞; 吴立柱; 王省芬; 马峙英

来源：棉花学报, 2007, 19(2): 134-138.

DOI：10.3969/j.issn.1002-7807.2007.02.011

• 棉花
• 转基因植株
• 卡那霉素
• 鉴定

通过试验研究,提出了3种室内快速筛选和鉴定含NPTⅡ标记基因的转基因抗虫棉的方法.一是待检测棉子去种皮,在含卡那霉素培养基培养,根据幼苗子叶颜色和棉苗状态来辨别是否是转基因材料,卡那霉素最适浓度为0.75 g·L-1;二是去皮种子培养在无卡那霉素的萌苗培养基上,在棉苗子叶上涂抹卡那霉素溶液进行鉴定,最适浓度为4.0 g·L-1;三是在待测棉苗子叶上打孔、滴加一定浓度的卡那霉素,根据打孔并滴加卡那霉素部位的叶片颜色变化,鉴别并统计转基因植株,其最适浓度为2.0 g·L-1.3种方法均可在卡那霉素处理后4～7 d内快速鉴定出转基因植株.同时,对转基因阳性植株进行PCR鉴定,结果表明3种卡那霉素方法鉴定的准确率均在90%以上.

• 单位
  河北农业大学; 华北电力大学（保定）