环状RNA VMA21抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激机制研究

作者：雒建卫; 张羽^*; 卫雷; 王梓良

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(07): 1300-1303.

• 环状RNA
• 血管内皮细胞
• 氧化应激

目的探讨环状RNA VMA21(circVMA21)对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激的影响及其机制。方法人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)随机分为Control、LPS、LPS+pcDNA-circVMA21、LPS+pcDNA、LPS+微小RNA(miR)-122-5p inhibitor、LPS+anti-miR-NC、LPS+pcDNA-circVMA21+miR-122-5p mimic组;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circVMA21和miR-122-5p的表达水平;细胞计数检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测蛋白表达;酶联免疫吸附法检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;双荧光素酶报告实验检测circVMA21和miR-122-5p的靶向关系。两组间均数比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析(组间两两比较采用LSD-t检验)。结果 LPS诱导的HUVEC中circVMA21表达水平降低(0.17±0.02比1.00±0.00), miR-122-5p表达水平升高(3.76±0.09比1.00±0.00), 细胞活性降低(0.41±0.02比1.22±0.07), 细胞凋亡率(24.17±0.93比7.62±0.39)及裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)表达水平升高(0.80±0.06比0.13±0.01), MDA含量[(736.11±27.21) nmol/ml比(159.37±14.93) nmol/ml]及LDH活性升高[(486.45±16.07) U/L比120.58±9.00) U/L], SOD活性降低[(46.25±4.44) U/L比238.49±11.23) U/L, t=9.721、13.122、15.321、22.472、10.817、38.123、18.237、25.522, P<0.05];与LPS组和LPS+anti-miR-NC组比较, LPS+miR-122-5p inhibitor组miR-122-5p表达水平降低, 细胞活性升高, 细胞凋亡率及cleaved-Caspase-3表达水平降低, MDA含量及LDH活性降低, SOD活性升高(F=2 564.169、693.501、540.990、704.667、41 336.059、1 170.734、414.559, P<0.05)。与LPS+pcDNA-circVMA21组比较, LPS+pcDNA-circVMA21+miR-122-5p mimic组miR-122-5p表达水平升高, 细胞活性降低, 细胞凋亡率及cleaved-Caspase-3表达水平升高, MDA含量及LDH活性升高, SOD活性降低(F=810.792、298.432、376.370、279.806、634.476、528.520、343.420, P<0.05)。结论 circVMA21通过下调miR-122-5p抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激。

• 单位
  山西医科大学; 山西省人民医院