鹅圆环病毒TB Green实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用

作者：赵敏; 李家玉; 黄瑜; 万春和^*

来源：福建畜牧兽医, 2022, 44(04): 26-30.

• 鹅圆环病毒
• TB Green
• 实时荧光定量PCR方法

鹅圆环病毒主要感染宿主的淋巴细胞，导致其免疫功能下降，造成继发感染和共感染。为建立鹅圆环病毒分子检测方法，本研究根据NCBI数据库中GoCV基因特征，设计特异性引物，建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法。结果显示，建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法，灵敏度高，最低检测限为54.10拷贝/μL；特异性好，与水禽常见传染病病原均无交叉反应，扩增产物的熔解曲线仅GoCV出现1个特异性单峰，Tm值为（84.46±0.09）℃；重复性好，组内和组间重复试验变异系数分别为0.26%～0.55%和0.23%～0.87%。利用建立的TB Green实时荧光定量PCR方法和常规PCR方法同时对64份临床样品进行GoCV感染的检测，结果显示，常规PCR方法检出阳性样品15份，阳性率为23.44%;TB Green实时荧光定量PCR方法检出阳性样品18份，阳性率28.13%，且15份PCR阳性样品经TB Green实时荧光定量PCR方法检测均为阳性，符合率为100%。本研究为后续开展GoCV感染的分子流行病学调查和致病机理研究提供技术支撑。

• 单位
  福建省禽病防治重点实验室; 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心; 福建农林大学; 生命科学学院; 福建省农业科学院