CARD9基因敲除对C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘模型气道炎症的影响

作者：葛翔挺; 王美燕; 郑锐; 张宁杰; 张亚利^*; 戴元荣^*

来源：中华医学杂志, 2023, 103(10).

• 哮喘
• 胱天蛋白酶募集域蛋白9
• 激素抵抗型哮喘
• 气道炎症

目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘气道损伤和炎症中的作用。方法采用随机数字表法, 将6～8周龄无特定病原体(SPF)级C57BL/6雌性小鼠分为A组(对照组)、B组(模型组)和C组(地塞米松治疗组), 每组6只, B组及C组利用卵清白蛋白(OVA)/完全弗氏佐剂(CFA)腹部皮下注射, OVA雾化激发构建小鼠模型, C组每次致敏前30 min给予地塞米松, 末次激发24 h后检测其病理变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数, 进行肺组织炎症浸润情况评分, Western blot检测造模前后CARD9蛋白的变化;然后将雌性6～8周龄C57BL/6野生型小鼠12只和CARD9基因敲除型小鼠12只分为4组, 每组6只, 其中D组为野生型对照组, E组为野生型模型组, F组为CARD9基因敲除对照组, G组为CARD9基因敲除模型组, 造模如上述对照组和模型组。苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化, ELISA法检测BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-17, RT-PCR法检测CXC趋化因子配体10(CXCL-10)和IL-17 mRNA水平。结果 B组炎症浸润评分[(3.33±0.82)比(0.67±0.52)分]和BALF总细胞计数[(10.13±4.83)×105个/ml比(3.76±0.84)×105个/ml]均高于A组(均P<0.05);C组炎症浸润评分[(2.83±0.75)分]和BALF总细胞计数[(9.80±3.19)×105个/ml]与B组差异无统计学意义(P>0.05);B组CARD9蛋白表达高于A组(0.245±0.090比0.047±0.014, P=0.004);肺组织病理结果显示, 与E组及F组相比, G组的肺组织炎症细胞浸润及组织结构破坏程度加重。与E组及F组相比, G组炎症细胞总数、中性粒细胞数量和嗜酸粒细胞数量均升高(均P<0.05);IL-4、IL-5及IL-17表达水平均升高(均P<0.05);支气管肺组织中IL-17及CXCL-10 mRNA表达水平亦均升高(均P<0.05)。结论 CARD9基因的缺失可能通过升高IL-17及CXCL-10等中性粒细胞趋化因子, 增加中性粒细胞的浸润, 从而加重C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘。

• 单位
  温州医科大学; 温州医科大学附属第二医院