肾原位抑制miR-146b-5p表达改善UUO小鼠肾纤维化

作者：谢柯欢; 郭怀英; 韩壤乐; 王丽^*

来源：中国实验动物学报, 2022, 30(07): 927-934.

• miR-146b-5p
• 靶向电转敲低技术
• 肾纤维化
• 慢性肾疾病

目的 明确miR-146b-5p在小鼠肾纤维化模型中的表达情况，并探讨体内敲低miR-146b-5p对小鼠肾损伤及纤维化的影响。方法 将24只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组(sham),UUO模型组(UUO),UUO+肾miR-146b-5p电转敲低组(UUO-KD),每组8只。Sham组仅切开皮肤，暴露且游离右侧肾输尿管，不做结扎或离断处理。UUO组，行单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型。UUO-KD组通过先电转CRISPR/RfxCas13 d质粒于小鼠肾进行特异性miR-146b-5p敲低，24 h后按模型组方法建立UUO小鼠模型，7 d后处死小鼠收集肾标本。HE染色观察肾病理变化，Masson检测肾间质纤维化程度，免疫组化检测纤维化相关蛋白(α-SMA、FN、Col-1)表达，Western Blot、Real-time PCR检测miR-146b-5p、α-SMA、FN、IL-1β、IL-6、TNF-α等基因的变化。结果 miR-146b-5p在UUO模型中显著升高，电转敲低miR-146b-5p后该基因显著下降(P<0.05),同时，IL-1、IL-6、TNF-α等炎性因子表达出现显著下调(P<0.05)经HE、Masson染色后观察到，UUO-KD组较UUO组相比肾结构良好，肾小管变形轻微，肾损伤及纤维化程度均明显改善。且免疫组化结果发现：α-SMA、FN、Col-1等纤维化指标在UUO-KD组也显著降低(P<0.0001)。结论 抑制UUO中高表达的miR-146b-5p可明显改善肾纤维化，miR-146b-5p可能是肾纤维化的一个潜在治疗靶标。

• 单位
  西南医科大学