制备醛固酮多克隆抗体建立检测血浆醛固酮的化学发光免疫分析法

作者：冯婷婷; 杨超一; 张雪峰; 王斌

来源：中国免疫学杂志, 2018, 34(01): 65-70.

• 醛固酮(ALD)
• 多克隆抗体
• 生物素-链霉亲和素系统
• 化学发光免疫分析法

目的:制备可用于免疫分析的醛固酮(ALD)多克隆抗体,并建立基于生物素-链霉亲和素放大系统的ALD化学发光免疫分析方法,用于测定人血液中的ALD含量。方法:对ALD进行化学改造,制备醛固酮肟,再与BSA偶联制备免疫原,免疫兔,制备抗ALD多克隆抗体。以生物素-链霉亲和素放大系统采用竞争法建立ALD化学发光免疫分析方法。结果:经检测免疫的3号兔获得的抗ALD抗体灵敏度最高,50%抑制率(IC50)ALD浓度是268 pg/ml。用该抗体建立的化学发光免疫分析法的检测范围为62.52 000 pg/ml,灵敏度为23.7 pg/ml,批内变异系数为6.9%9.5%,批间变异系数为8.5%12.7%,回收率范围为93.1%104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.996,与放射免疫分析试剂盒的相关性方程分别为y=0.932x+4.596,相关系数r=0.948(n=95)。结论:建立的检测ALD的化学发光免疫分析法符合临床应用的基本要求。

• 单位
  原子高科股份有限公司