缺氧环境对宫颈腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制

作者：刘艳; 李月洁; 黄小环; 龚莉; 周铁军^*

来源：山东医药, 2019, 59(31): 46-50.

• 宫颈腺癌
• 缺氧环境
• 缺氧诱导因子2α
• 血管内皮钙黏蛋白
• 细胞增殖
• 细胞迁移

目的探讨缺氧环境对宫颈腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法将传3代、对数生长期、生长状态良好的宫颈腺癌HeLa细胞接种于96孔板,分别给予50、100、150、200、250μmol/L氯化钴(CoCl2)干预,另设对照孔,不予CoCl2干预。干预24、48、72 h,收集细胞,采用MTT法检测各孔细胞增殖抑制率。选取细胞增殖抑制率最低的CoCl2浓度作为后续构建细胞缺氧模型的最佳浓度。将HeLa细胞接种于6孔板,随机分为观察组和对照组,观察组通过CoCl2构建细胞缺氧模型,对照组常规培养,显微镜下观察继续培养0、48 h划痕距离,计算细胞迁移率。将HeLa细胞接种于6孔板,通过CoCl2构建细胞缺氧模型,分别于CoCl2干预0、24、48、72 h收集细胞,采用RT-PCR、Western blotting法检测缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin) mRNA和蛋白表达。结果 50、100μmol/L CoCl2干预24 h能够促进HeLa细胞增殖(P均<0.05),且以100μmol/L时效果更强,故后续选择100μmol/L CoCl2构建细胞缺氧模型。150、200、250μmol/L CoCl2干预24 h即可表现出对HeLa细胞增殖的抑制作用,且随着干预时间延长,细胞增殖抑制作用越来越明显(P均<0.05)。观察组与对照组细胞迁移率分别为(61.4±4.8)%、(37.9±3.6)%,两组比较P<0.01。缺氧环境下,HeLa细胞HIF-2α、VE-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),但后者表达随着缺氧时间延长有所降低。Pearson直线相关分析显示,缺氧环境下HeLa细胞HIF-2α表达与VE-cadherin表达呈正相关关系(P均<0.05)。结论一定程度缺氧能够促进宫颈腺癌细胞增殖和迁移能力,其机制可能与缺氧环境能够增强HIF-2α、VE-cadherin表达有关。

• 单位
  重庆三峡医药高等专科学校; 西南医科大学