一个用于转染细胞分选的双顺反子载体的构建及其应用

作者：曲笑霞; 秦立蓬; 岳文; 高艳红; 李艳华; 袁红丰; 王韫芳; 刘大庆; 闫舫; 施双双; 裴雪涛

来源：生物化学与生物物理进展, 2005, (09): 889-894.

• 载体
• 转染细胞
• 分选
• CD34

为简化转染细胞的分选过程,构建了一个含有细胞表面标志CD34基因的双顺反子载体p3.1-IRES-CD34.利用来源于脑心肌炎病毒(EMCV)的内部核糖体进入位点(IRES),实现目的基因与CD34基因的共同表达.将绿色荧光蛋白(EGFP)作为目的基因插入载体的多克隆位点,然后转染NIH-3T3细胞,通过免疫磁珠分选(MACS)方法来分选细胞.结果表明:对于转染细胞,均可实现快速分选(瞬时转染细胞约48h,稳定转染10￣15天),并且获得较高纯度(95%以上)的表达目的基因细胞.

• 单位
  军事医学科学院