DHX9调控白血病细胞增殖及凋亡的作用机制研究

作者：黄楠芳; 宋扬; 郭娟; 张征; 李晓; 许峰^*

来源：医学研究杂志, 2023, 52(09): 29-34.

• DHX9
• 急性髓系白血病
• p53
• 细胞凋亡

目的 研究DHX9在白血病患者中的表达水平，以及对白血病细胞增殖及凋亡的影响和作用机制。方法 分析GEO数据库中白血病及对照样本DHX9基因表达情况，探索其表达差异。通过慢病毒感染人白血病细胞系K562,构建DHX9敲低细胞系。采用CCK-8法检测细胞增殖，Annexin V-PI法检测细胞凋亡，基因表达谱筛查DHX9潜在靶向通路，通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)和Western blot法验证DHX9调控的机制。结果分析GEO数据库中的MILE研究(GSE13159),该研究纳入AML、MDS、CML及正常对照的基因表达谱分析，结果显示，AML组DHX9基因表达水平较对照组明显增高(P=0.007),较MDS组及CML组也明显增高(P均<0.001);而CML组DHX9表达明显低于AML组、MDS组及对照组(P均<0.001)。本研究构建了DHX9敲低的白血病细胞株K562(DHX9相对表达量为0.48±0.06,P<0.01)。与对照组比较，DHX9敲低的K562细胞呈现明显增高的自身凋亡率(P<0.001),对抗肿瘤药物阿扎胞苷(5-azacitidine, AZA)的凋亡敏感度也明显增加(P<0.05)。CCK-8增殖实验显示，DHX9敲低细胞增殖能力减弱(P<0.001)。通过基因表达谱分析获得了2264个差异基因，生物信息学分析显示，差异表达基因主要富集在癌症通路、凋亡和p53通路(P均<0.001)。Western blot法检测结果显示，DHX9敲低增加凋亡相关蛋白caspase-9的表达，降低Bcl-2表达。结论 从正常对照到MDS再到AML,DHX9表达逐步增加预示较高的肿瘤增殖度和白血病转化风险，DHX9可能通过抑制p53介导的细胞凋亡促进白血病细胞增殖。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第六人民医院