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摘要
本研究通过RT-PCR技术克隆铁皮石斛DoglgC基因以及构建表达载体，研究DoglgC对淀粉、蔗糖等合成的影响。结果表明，获得了1 476 bp的开放阅读框；将铁皮石斛DoglgC与拟南芥大亚基ATglgC、水稻小亚基OTglgC和大肠杆菌ECglgC序列进行比对，结果表明序列高度保守。通过系统发育树分析发现DoglgC氨基酸序列和‘小兰屿蝴蝶兰’亲缘关系最近，属于类可逆糖基化多肽分支。利用DNA同源重组技术构建了表达载体p BI121s-DoglgC，用蘸花法将glgC基因转入野生拟南芥中，通过拟南芥植株表型观察发现，转DoglgC的拟南芥生长慢，叶片比野生型拟南芥的小。多糖含量的测定结果表明转DoglgC基因拟南芥多糖含量高于野生型拟南芥(WT)，说明DoglgC基因能增加铁皮石斛多糖的合成。本研究验证了DoglgC基因对铁皮石斛多糖含量的影响，利于培育具有更高营养价值的作物。
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