STAT3对肺泡上皮细胞表面活性物质相关蛋白表达的影响

作者：贡永健; 许卫东; 陶慧娴; 卢志涛; 陈旸; 周晓玉; 周晓光^*

来源：国际儿科学杂志, 2018, 45(09): 724-728.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4408.2018.09.018

• 信号传导及转录活化因子3
• 肺表面活性物质相关蛋白
• 慢病毒
• 小干扰RNA
• A549细胞

目的探讨信号传导及转录活化因子3 (signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对肺泡上皮细胞表面活性物质相关蛋白(surfactant proteins,SP)表达的调控作用。方法构建过表达STAT3的慢病毒并感染人肺泡上皮细胞A549细胞,构建过表达STAT3基因的A549细胞株;设计并化学合成STAT3的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),在脂质体(Lipofectamine3000)的介导下转染A549细胞,构建沉默STAT3的A549细胞;采用Real-time PCR法分别检测STAT3过表达和沉默后STAT3、SP-A、SP-B、SP-C和SP-D mRNA的表达量,Western blot法检测STAT3、磷酸化STAT3(pSTAT3)、SP-A、SP-B、SP-C和SP-D蛋白的表达。结果通过Real-time PCR和Western blot法检测STAT3的表达,结果证明成功构建了过表达/沉默STAT3的A549细胞株;与空载病毒组(LV5-Mock)相比,过表达STAT3组(LV5-STAT3)的SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白的表达均上调(P <0.05);与阴性对照组(NC)及转染试剂对照组(Mock)相比,沉默STAT3组(siRNA)SP-A、SP-B、SP-C和SP-D mRNA和蛋白的表达均下调(P<0.05)。结论 STAT3对肺表面活性物质相关蛋白的表达具有调控作用,过表达STAT3基因能够促进SP的表达,沉默STAT3基因抑制SP的表达。

• 单位
  南京医科大学; 张家港市第一人民医院