luxAB发光基因标记的铜绿假单胞菌株的构建

作者：李闻; 刘红艳; 黄正

来源：卫生研究, 2011, (01): 57-60.

• luxAB基因
• 铜绿假单胞菌
• 接合转移
• 二亲本杂交
• 生物检测 luxAB gene
• Pseudomonas aeruginosa
• conjugative transfer
• bi-paretal mating
• luminescence

目的构建表达luxAB发光基因的铜绿假单胞基因工程菌。方法用BglⅡ酶切pUC-luxAB质粒,回收luxAB片段与BamHⅠ酶切的质粒载体pBBR1MCS-5连接形成重组质粒pBBR-luxAB,再转化E.coliDH5α感受态细胞,经庆大霉素抗性、氯霉素抗性、发光检测多重筛选含有pBBR-luxAB重组质粒的的阳性克隆,并设立对照菌株。抽提pBBR-luxAB质粒、酶切、凝胶电泳,验证质粒构建的正确性。通过二亲本杂交方式将pBBR-luxAB质粒导入铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),构建基因工程菌铜绿假单胞菌(pBBR-luxAB)并对其进行质粒传代稳定性、发光...

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 天津市疾病预防控制中心