基于杂交链式反应的志贺菌核酸快速检测研究

作者：钟心怡; 庄妙慧; 杨琪玲; 杨欢; 胡善文^*

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2023, 46(01): 1-5.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2023.01.001

• 志贺菌
• 杂交链式反应
• 快速检测

目的建立一种以杂交链式反应为基础的快速检测志贺菌核酸的新方法。方法以志贺菌Cssr B基因的一段特异性核酸序列为靶标，设计带有FAM荧光基团标记的发卡探针，利用杂交链式反应扩增靶标序列；优化反应条件，评价信号的稳定性和选择性，绘制荧光信号与靶标浓度的工作曲线；通过人工质控检测及柑橘类水果实际样品检测验证方法的有效性。结果建立的方法经优化得到反应条件为0.2 mol/L Na+、1 mmol/L Mg2+的盐浓度，经平行测定荧光信号，RSD=0.12%，并且幽门螺杆菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌均不对其产生干扰信号，表明方法具有良好的稳定性和选择性；在志贺菌靶标核酸浓度为0.001～500 nmol/L范围内具有良好的线性关系，检出限为0.001 nmol/L(换算为0.015μg/L)；通过质控检测发现方法具有较好的准确性，且实际样品中未检出志贺菌。结论基于杂交链式反应的检测方法可以灵敏、稳定、特异性地检测志贺菌核酸，为志贺菌检测提供了一种新途径。

• 单位
  公共卫生学院; 福建医科大学; 厦门国际旅行卫生保健中心