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摘要
在国标GBT23527-2009福林酚试剂法测蛋白酶活力的基础上,以自产白曲为材料,研究底物浓度,反应时间,酶液浸取时间以及三氯乙酸沉淀时间对酶活测定结果的影响,并对方法进行部分改进。实验结果显示:国标法测白曲酸性蛋白酶活力时,存在底物不足的问题,利用Hanes作图法求得该酶米氏常数Km约为2.67g/L,确定底物酪蛋白浓度为30g/L;由反应进程曲线得到,反应时间5min更适合酶活测定;酶液浸取时间长会增加比色测定时背景值的干扰,在不影响测定结果的情况下,缩短了酶液的浸取时间;充分摇匀的前提下,三氯乙酸沉淀时间对测定结果无显著影响。
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