莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制研究

作者：周璐炜; 王娟; 陈旭

来源：中国药房, 2022, 33(05): 548-554.

• 莪术醇
• T47D乳腺癌细胞
• 细胞周期阻滞
• 细胞增殖
• 氧化应激
• 作用机制

目的 研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法 采用MTT法检测不同剂量莪术醇（0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL）对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用。以莪术醇（12.5、25、50、100μg/mL）干预T47D乳腺癌细胞后，采用倒置相差显微镜观察细胞形态；采用流式细胞仪检测细胞周期及活性氧（ROS）水平；采用实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期调控因子p21和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的mRNA表达水平；采用Western blot法检测CDK2、CDK6、细胞周期蛋白D(Cyclin D)、PCNA、核转录因子E2-相关因子（Nrf2）、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)的蛋白表达水平。另将细胞分为2组，其中一组加入不同剂量莪术醇，另外一组加入33μg/mL莪术醇干预6、12、24、48 h，根据以上2组结果确定最佳氧化时间和给药浓度后，另设空白对照组、N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（单用ROS抗氧化剂NAC）、莪术醇组（单用莪术醇）、莪术醇联合NAC组（采用ROS抗氧化剂NAC预处理，再加入莪术醇），检测细胞周期及ROS荧光强度。结果 莪术醇能使T47D乳腺癌细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05或P<0.01），并呈一定的剂量和时间依赖趋势。莪术醇能将T47D乳腺癌细胞周期阻滞于G1期，并使ROS水平显著增加（P<0.05或P<0.01）;ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇的上述诱导作用（P<0.01）。qRT-PCR结果显示，莪术醇能下调PCNA和CDK2 mRNA的表达，并上调p21 mRNA的表达（P<0.05或P<0.01）。Western blot结果显示，莪术醇能显著下调Keap1、Nrf2、CDK2、CDK6和Cyclin D的蛋白表达（P<0.05或P<0.01）;ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇对上述蛋白表达的下调作用（P<0.05或P<0.01）。结论 莪术醇可能通过诱导氧化应激和细胞周期阻滞，发挥抑制T47D乳腺癌细胞增殖的作用。

• 单位
  桂林医学院; 基础医学院