长链非编码RNA MAFG-AS1通过靶向miR-143-3p/AKT2轴促进胃癌的进展

作者：陈军芳^*; 岳新荣; 贺大春

来源：肿瘤, 2021, 41(03): 149-162.

• 胃肿瘤
• RNA,长链非编码
• 微RNAs
• 细胞增殖
• 细胞迁移分析

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)MAFG-AS1在胃癌(gastric cancer,GC)的发生和发展中的生物学功能及可能的作用机制。方法:分别用GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析MAFG-AS1在GC组织中的表达水平,及与GC患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR法检测胃黏膜正常上皮GES-1细胞和人GC细胞系BGC-823、SGC-7901和MGC-803中MAFG-AS1的表达水平。采用脂质体转染法将MAFG-AS1过表达重组质粒转入MGC-803细胞,分别采用CCK-8法和EdU染色法检测MAFG-AS1过表达对MGC-803细胞增殖的影响,Transwell小室实验检测对MGC-803细胞迁移的影响。利用StarBase数据库预测MAFG-AS1和微RNA(microRNA,miRNA,miR)-143-3p之间,miR-143-3p和AKT2(AK mouse plus Transforming or Thymoma 2)基因之间的靶向关系,并分别采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。采用实时荧光定量PCR法检测MAFG-AS1、miR-143-3p和AKT2 mRNA在癌及癌旁组织中的表达水平,分别应用Pearson对MAFG-AS1和miR-143-3p之间,miR-143-3p和AKT2 mRNA之间,MAFG-AS1和AKT2 mRNA之间表达水平的相关性进行分析。采用脂质体转染法将miR-143-3p-模拟物(miR-143-3p-mimics)或特异性针对AKT2基因的siRNA(siAKT2)转入MAFG-AS1过表达的MGC-803细胞中,采用蛋白印迹法检测对AKT2蛋白表达水平的影响,再分别采用CCK-8法和EdU染色法检测对MGC-803细胞增殖的影响,Transwell小室实验检测对MGC-803细胞迁移的影响。结果:MAFG-AS1在GC组织和细胞中高表达(P值均<0.001),其高表达水平与患者总生存期、首次进展生存期以及后进展生存期呈负相关(P值均<0.05)。MAFG-AS1与miR-143-3p表达呈负相关(P<0.05),与AKT2 mRNA表达呈正相关(P<0.05)。过表达MAFG-AS1可促进细胞增殖和迁移(P值均<0.001),而上调miR-143-3p表达可削弱此作用(P值均<0.05)。结论:MAFG-AS1通过调控miR-143-3p/AKT2轴在GC的进展中发挥促进作用。

• 单位
  湖北航天医院; 湖北职业技术学院