维生素A修饰的纳米载体靶向肝星状细胞沉默TLR4基因并抑制其激活的体外实验研究

作者：陈志伟; 韩世松; 安泳橙; 周智美; 陈烨; 林立腾; 朱康顺^*

来源：介入放射学杂志, 2020, 29(10): 1008-1015.

• 肝纤维化
• 纳米载体
• 肝星状细胞
• Toll样受体4
• 小干扰RNA

目的制备由维生素A(VA)修饰的纳米载体聚乙二醇(PEG)-聚乙烯亚胺(PEI),用于靶向肝星状细胞(HSC)(LX-2细胞株)输送Toll样受体(TLR)4小干扰RNA(siRNA)。观察和评估VA-PEGPEI对LX-2细胞转染效率、TLR4/核因子(NF)-κB信号通路和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达的影响。方法采用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测纳米基因药物细胞毒性。通过流式细胞术和荧光显微镜观察纳米药物转染效率。脂多糖(LPS)刺激LX-2细胞,并用不同多聚体[VA-PEG-PEI/TLR4 siRNA(siTLR4)或PEG-PEI/siTLR4]进行转染。蛋白质印迹法(WB)和免疫荧光法分别检测LX-2细胞TLR4/NF-κB信号通路蛋白水平和α-SMA表达。结果高浓度(40μg/mL)VA-PEG-PEI/siTLR4孵育下LX-2细胞仍具有80%以上存活率,表明纳米药物细胞毒性较低。LPS刺激的LX-2细胞TLR4/NF-κB信号通路水平升高,这种作用经VA-PEG-PEI/siTLR4处理后显著减弱。同时,VA-PEG-PEI/siTLR4能有效地使LX-2细胞失活,这可通过降低纤维化标志物α-SMA表达证明。结论 VA-PEG-PEI/siTLR4能高效转染siRNA,有效下调LX-2细胞中TLR4/NF-κB信号通路和α-SMA表达。本体外实验研究表明,VA-PEG-PEI/siTLR4具有治疗肝纤维化的巨大潜力。

• 单位
  广州医科大学附属第二医院