大鼠胰腺星状细胞分离培养与鉴定

作者：崔立华; 张淑坤; 崔乃强; 夏亚飞; 许大辉

来源：中国中西医结合外科杂志, 2014, 20(05): 504-507.

• 胰腺星状细胞
• 细胞培养
• 胰腺纤维化

目的:分离培养大鼠胰腺星状细胞,为体外研究胰腺纤维化提供细胞模型。方法:采用酶消化结合Nycodenz密度梯度离心法分离胰腺星状细胞,通过倒置显微镜观察细胞形态,油红O染色和免疫细胞化学染色desmin,α-SMA进行细胞鉴定,并绘制传代后细胞生长曲线。结果:原代培养的大鼠胰腺星状细胞呈星形或梭形生长;原代胰腺星状细胞油红O染色胞浆均可见红色密集脂滴,直至传代后消失;原代胰腺星状细胞培养48 h后,desmin表达开始减弱,α-SMA表达开始增强;传代后desmin基本不表达,α-SMA阳性表达100%;传代后第3 d5 d的胰腺星状细胞处于快速增殖阶段。结论:酶消化结合Nycodenz密度梯度离心法分离培养大鼠胰腺星状细胞纯度高,重复性好,可以满足体外研究的需要。

• 单位
  天津市中西医结合急腹症研究所; 天津市南开医院