小鼠p38MAPK重组腺病毒载体的构建及其在成骨细胞系中的表达

作者：白雪东; 胡蕴玉; 李航; 侯黎升; 李海峰

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (04): 367-369+373.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005855

• p38MAPK
• 腺病毒
• 成骨细胞 P38 mitogen-activated protein kinase(MAPK)
• adenovirus
• osteoblast

目的:利用AdEasyTM system构建携带小鼠p38MAPK基因的重组腺病毒,感染成骨细胞系MC3T3-E1,检测外源p38MAPK在细胞中的表达。方法:用PCR的方法扩增p38MAPK基因,将其克隆到pMD18-T载体中,进行测序。经BglⅡ和HindⅢ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-CMV-p38MAPK。将经PmeI线性化的pShuttle-CMV穿梭载体与pAdEasyTMDNA电穿孔共转化BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-p38MAPK,再将经PacI线性化的Ad-p38MAPK重组病毒骨架质粒转染AD293包...

• 单位
  西京医院; 中国人民解放军海军总医院; 第四军医大学