溶瘤腺病毒ZD55-特异性核基质结合区结合蛋白1对雄激素非依赖前列腺癌细胞DU145增殖和侵袭的影响

作者：仇存权; 陈家存

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(01): 82-85.

• 溶瘤腺病毒
• 特异性核基质结合区结合蛋白1
• 增殖
• 侵袭

目的观察携带特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1对雄激素非依赖前列腺癌细胞DU145增殖和侵袭的影响。方法同源重组法包装溶瘤腺病毒ZD55-SATB1;转染倍数(MOI)=10.0的病毒感染DU145细胞72 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测ZD55-SATB1对前列腺癌细胞SATB1基因的mRNA表达的影响;Western blot检测ZD55-SATB1对前列腺癌细胞SATB1蛋白表达的影响及病毒复制能力;结晶紫染色法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测ZD55-SATB1对细胞的增殖抑制和毒性作用;细胞侵袭试验检测细胞侵袭力改变。结果成功包装病毒ZD55-SATB1;RT-PCR和Western blot结果显示:ZD55-SATB1组SATB1表达量明显减少,与对照组比较差异有统计学意义。E1A蛋白表达水平在前列腺癌细胞DU145显著高于人正常前列腺上皮细胞PZ-HPV-7,差异有统计学意义,表明ZD55-SATB1具有肿瘤靶向性;结晶紫染色示:ZD55-SATB1组DU145有明显的细胞病效应。CCK-8结果显示:细胞感染后4 d,ZD55-SATB1组细胞存活率为(31.60±3.31)%,显著低于ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)组(61.70±2.42)%(P=0.025)和Ad-SATB1组(82.40±3.54)%(P=0.017),差异有统计学意义。Transwell细胞侵袭实验结果显示:ZD55-SATB1组侵袭细胞数为(61.30±17.25)个,显著低于Ad-SATB1组[(170.10±25.44)个,P=0.043],ZD55-EGFP组[(295.40±23.36)个,P=0.013]和磷酸盐缓冲液(PBS)组[(490.50±33.36)个,P=0.009],与对照组比较差异有统计学意义。结论携带SATB1基因shRNA的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1可有效沉默前列腺癌细胞DU145中SATB1基因的表达,同时有效抑制DU145细胞的增殖和侵袭。

• 单位
  徐州医学院附属医院