摘要

目的 从天麻中获取脑线粒体靶向化合物,并对获取的化合物进行神经保护活性研究。方法 提取大鼠脑组织中线粒体,通过健那绿和中性红染色评估线粒体的纯度,并通过检测线粒体膜电位(MMP)评估纯化线粒体的活性。以纯化线粒体为对照组、失活的纯化线粒体为实验组,测定并计算对照组和实验组的峰面积之差与对照组峰面积的比值(ΔP),来验证线粒体靶向化合物获取方法的可行性。通过超滤离心-高效液相色谱(HPLC)法获取天麻中脑线粒体靶向化合物并进行指认,检测其对离体线粒体活性的影响。进一步针对活性较高的化合物,采用缺氧缺糖/复氧(OGD/R)损伤HT22细胞研究其神经保护活性。结果 提取所得的脑线粒体纯度高,具有活性。可行性验证结果显示,超滤离心-HPLC法具有识别分离功能,可用于获取具有线粒体靶向功能的化合物。从天麻中获取了2个脑线粒体靶向化合物(对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛),两者均可提高离体线粒体活性,其中对羟基苯甲醇活性更高。细胞实验结果显示,对羟基苯甲醇以给药浓度25、50、100μmol/L预处理,对HT22细胞存活率影响较小。与模型组相比,对羟基苯甲醇处理可降低OGD/R损伤细胞死亡率,改善模型细胞形态,提高模型细胞ATP、MMP水平,降低模型细胞中乳酸脱氢酶、活性氧水平与线粒体通透性转换孔开放程度,大部分差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 从天麻中获取2个脑线粒体靶向化合物(对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛),其中对羟基苯甲醇对OGD/R诱导的神经细胞损伤有明显的保护作用,可能是通过线粒体靶向治疗发挥神经保护作用。

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