新疆野苹果SSR-PCR反应体系的优化

作者：刘遵春; 苗卫东; 刘大亮; 陈学森

来源：广东农业科学, 2012, (04): 97-100.

DOI：10.16768/j.issn.1004-874x.2012.04.072

• 新疆野苹果
• SSR-PCR
• 优化 Malus sieversii
• SSR-PCR
• optimization

以4个新疆野苹果株系为试材,利用CTAB法提取DNA,对影响SSR-PCR扩增结果的主要因子设计了多梯度的优化试验。结果表明:新疆野苹果SSR-PCR反应体系(25μL)中含Taq DNA聚合酶0.5 U、模板DNA 5.0 ng、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.2μmol/L、Mg2+1.0 mmol/L、退火温度为60℃时效果最佳。最佳扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30 s,65℃退火1 min,72℃延伸1 min,4个循环;94℃变性30 s,60℃退火1 min,72℃延伸1 min,30个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。利用此反应体系对30份新疆野苹...

• 单位
  山东农业大学; 河南科技学院