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摘要
【背景】开发、筛选优良益生菌菌种是当下畜牧业的研究热点，益生菌的潜在功能也被广为挖掘。【目的】分离、筛选具有良好耐受性且高产胞外蛋白酶的菌株，研究其生物学特性和酶学性质，为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源。【方法】采集健康水貂新鲜粪便，配制酪蛋白培养基初筛和优化Folin-酚法复筛，对筛选菌进行生物学特性研究，获得产蛋白酶能力较强、耐受性较优的菌株，并进行常规鉴定和分子生物学鉴定，最后对蛋白酶酶学性质进行研究。【结果】筛选得到一株高产蛋白酶、耐受性较优的芽孢杆菌，经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，编号为3。在初始发酵培养基条件下，酶学性质研究结果表明，该蛋白酶的最适反应温度为70℃，最适反应pH值为9.0，最佳金属离子激活剂为K+,Cu2+和Fe2+对酶活力有明显的抑制作用，在20%浓度的有机溶剂作用时蛋白酶未变性失活。【结论】从水貂粪便中分离获得一株具有良好的生物学特性、酶学性质和碱性蛋白酶活性的枯草芽孢杆菌，为该菌株在实际生产应用中提供了基础保障。
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