重组金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素对人肺泡巨噬细胞细胞因子表达的影响

作者:吴本权; 石云锋; 黄静; 刘慧; 张文先; 周凤丽; 张天托
来源:中华结核和呼吸杂志, 2009, 32(7): 503-507.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2009.07.007

摘要

目的 应用体外培养人肺泡巨噬细胞(AM),观察重组金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素(rPVL)对AM的CD14白细胞介素(IL)-10及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响.方法 从患者BALF中分离纯化AM,根据作用时间及rPVL浓度不同分为T0N0组[T为时间(h),N为毒素浓度(nmol/L)]、T6N0组、T6N10组、T6N100组、T24N0组、T24N10组、T24N100组共7组.半定量逆转录PCR法测定AM的CD14mRNA水平,双抗夹心ELISA法测定AM培养液上清IL-10及TNF-α浓度.结果 rPVL作用后AM的CD14mRNA下降,降低幅度随时间延长和毒素浓度升高而增加.3组空白对照组间差异无统计学意义(F=1.708,P>0.05).T6N10、T6N100组均较T6 N0组低(t=4.132、6.818,均P<0.001);T6N10、T24N100组均较T24N0组低(t=7.401、11.415,均P<0.001),表明毒素作用后CD14表达量降低.T24N10组低于T6N10组、T24N100组低于T6N100组(t=4.692、6.019,均P<0.001),表明毒素作用后CD14mRNA随时间延长而降低.T6N100组低于T6N10组、T24N100组低于T24N10组(t=2.686、4.014,均P<0.05),表明CD14mRNA随毒素浓度升高而降低.IL-10浓度T24N10、T24N100组均高于T24N0组(t=4.036、3.941,均P<0.01),表明IL-10的释放随毒素浓度增加和作用时间延长而增加.TNF-α浓度T24N10组低于T24N0组,而T24N100组高于T24N0组(t=2.824、8.468,均P<0.01),表明低浓度毒素可抑制TNF-α释放而高浓度毒素诱导其大量释放.结论 rPVL致AM的CD14表达下降并致AM促炎和抗炎因子表达异常,可致AM功能缺陷引起宿主免疫抑制,不利于炎性细胞对病原菌的清除,可能是杀白细胞毒素金黄色葡萄球菌感染,尤其是重症坏死性肺炎病死率高的重要原因之一.

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