新型冠状病毒肺炎（COVID-19）热灭活咽拭子及热灭活后提取核酸样本在4℃保存的稳定性研究

作者：喻晶; 吴夏枫; 刘晓翌; 纪玲

来源：现代检验医学杂志, 2020, 35(06): 132-134.

DOI：10.3969/j.issn.1671-7414.2020.06.032

• 新型冠状病毒肺炎
• 热灭活
• 咽拭子样本
• 提取核酸
• 4℃保存

目的研究56℃30 min热灭活后的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)咽拭子及提取的核酸在4℃保存的稳定性。方法采用多重荧光定量PCR方法对一例COVID-19患者的咽拭子样本,56℃30 min热灭活后进行COVID-19双靶点(ORF1ab和N基因)核酸检测,把原始咽拭子样本及提取的核酸保存在4℃,分别于24,48,72和96h再次检测咽拭子样本及提取核酸中新冠病毒核酸的含量(Ct值),分析热灭活后咽拭子样本及提取核酸在4℃保存的稳定性。结果 COVID-19患者的咽拭子样本,56℃30 min热灭活后核酸检测结果为ORF1ab和N基因双阳性,Ct值分别为31.27和30.64,咽拭子样本4℃保存24,48,72和96h后再次检测ORF1ab和N基因的结果为24h (31.41和30.68),48h (34.13和34.28),72h (34.06和34.11)和96h (36.22和40.02)。提取的核酸4℃保存24,48,72和96h后的检测结果为24h (31.64和30.06),48h (31.62和29.95),72h (31.72和29.75)和96h (31.36和30.09)。56℃30 min热灭活的咽拭子样本在4℃保存24h后,对COVID-19核酸的检测无明显影响(偏倚<1%),但4℃保存48～72h,ORF1ab基因核酸降解约7倍,N基因降解约11倍,4℃保存96h, ORF1ab和N基因核酸分别降解30.91倍和666.29倍。但是提取的核酸4℃保存24～96h后,对核酸的检测结果无明显影响(偏倚均小于3%)。结论研究结果表明56℃30 min热灭活后提取的核酸的稳定性比原始咽拭子样本好,热灭活后的咽拭子样本可在4℃保存24h。

• 单位
  北京大学深圳医院