转化生长因子β通过PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路调节肝祖细胞的迁移

作者：濮雪华; 李飞; 缪小莉; 叶纪录; 陆伦根^*

来源：中华肝脏病杂志, 2018, 26(09): 680-685.

• 肝
• 转化生长因子β
• 祖细胞
• 细胞迁移
• PI3K/AKT信号通路

目的探讨转化生长因子(TGF)β在体外对肝祖细胞迁移能力的影响及其作用机制。方法两步灌注法分离雄性野生型C57BL/6J小鼠原代肝祖细胞, 用不同浓度TGFβ刺激, 相差显微镜下观察细胞形态;划痕实验和Transwell实验评估TGFβ对肝祖细胞迁移能力的影响;表达谱测序和信号通路磷酸化抗体检测TGFβ对肝祖细胞调控涉及的信号通路, 并检测PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路蛋白水平及各信号分子在肝祖细胞中的定位。两组间数据比较用独立样本t检验, 多组间数据比较用单因素方差分析。结果 TGFβ使肝祖细胞由卵圆形变为长梭型, 划痕实验显示24 h对照组和2 ng/ml TGFβ、10 ng/ml TGFβ组的划痕愈合率分别为36.48%±4.37%、57.35%±4.60%、73.14%±5.02%(F = 65.87, P < 0.01)。Transwell实验显示24 h对照组和2 ng/ml TGFβ、10 ng/ml TGFβ组的迁移细胞数分别为(127±16)个、(230±18)个、(385±36)个(F = 94.99, P < 0.01)。表达谱测序结果表明TGFβ调控肝祖细胞基因表达, 其差异表达基因参与PI3K/AKT信号通路。信号通路磷酸化抗体芯片和Western blot检测结果显示TGFβ能调控肝祖细胞PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路。同时免疫荧光实验结果显示磷酸化(p)70S6K、pAKT1和PI3K与F-肌动蛋白共定位。结论 TGFβ能通过PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路促进肝祖细胞迁移, p70S6K、pAKT1和PI3K信号分子参与调控肝脏祖细胞的形态改变和迁移。

• 单位
  南京医科大学; 上海市第一人民医院; 泰州市人民医院