泥蚶JNK基因在哈维氏弧菌感染下的表达特征及其对激活蛋白-1的调控分析

作者：王秋金; 肖国强; 滕爽爽^*

来源：中国水产科学, 2023, 30(01): 60-74.

• 泥蚶
• JNK
• AP-1
• 弧菌感染
• 磷酸化调控

泥蚶(Tegillarca granosa)作为我国常见的滩涂养殖贝类，具有较高的经济价值。以弧菌为代表的条件致病菌一直以来是困扰双壳贝类健康养殖的一大难题。为了探讨泥蚶感染弧菌过程中,c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)介导的激活蛋白-1(activating protein-1,AP-1)先天免疫防御通路的作用及机制,本研究采用PCR技术克隆了泥蚶JNK基因(TgJNK)的c DNA序列,并对TgJNK和TgAP-1在弧菌感染下的表达和调控关系进行了分析。结果显示, TgJNK基因c DNA全长2696 bp,开放阅读框1332 bp,编码了443个氨基酸;蛋白多重比较和邻近系统发育树分析表明, TgJNK相对保守,存在一个STKc-JNK结构域,与长牡蛎(Crassostrea gigas)和紫贻贝(Mytilus edulis)的同源相似度较高。q RT-PCR和WB结果表明TgJNK在泥蚶的鳃中表达最高。哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）的浸泡感染可显著上调TgJNK的转录水平(P<0.05)和磷酸化水平,并增加TgAP-1的蛋白丰度; JNK抑制后TgJNK和TgAP-1的转录水平显著降低(P<0.05), TgJNK磷酸化水平和TgAP-1蛋白丰度也降低。CoIP分析显示,磷酸化的JNK蛋白能与TgAP-1蛋白相互结合。研究表明, TgJNK和TgAP-1共同参与了泥蚶感染弧菌后的先天免疫反应,TgJNK蛋白磷酸化是激活TgAP-1蛋白的重要因素, TgJNK能够正向调控TgAP-1的表达。本研究阐明了泥蚶先天免疫通路JNK介导的AP-1途径在弧菌感染过程中的信号传递机制,丰富了泥蚶等双壳贝类先天免疫理论知识。

• 单位
  浙江省海洋水产养殖研究所; 上海海洋大学