羟基喜树碱对系统性红斑狼疮患者单核淋巴细胞中p16基因表达和启动子甲基化修饰的影响

作者：张伟; 王慧; 王永福

来源：中国医院药学杂志, 2015, 35(08): 685-689.

DOI：10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2015.08.05

• 羟基喜树碱
• 系统性红斑狼疮
• p16基因
• DNA甲基化

目的:探讨羟基喜树碱(Hydroxycamptothecin,HCPT)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)甲基化敏感基因p16的表达和启动子甲基化修饰的影响。方法:密度梯度离心法分离得外周血单个核细胞,使用浓度为0.25、0.5、1和2 mg·L-1的HCPT处理SLE患者PBMC,24 h后收集细胞。MTT法检测处理后PBMC的活力。定量PCR检测p16及DNA甲基转移酶1(DNA Methyltransferase1,Dnmt1)基因mRNA表达水平,2-ΔΔct法分析结果。甲基化特异性PCR分析p16基因启动子区甲基化水平。结果:(1)HCPT处理24h后,0.25、0.5和1 mg·L-1 HCPT处理组PBMC活力之间比较差异无统计学意义(P>0.05),2 mg·L-1 HCPT处理组PBMC活力与0.25、0.5和1 mg·L-1 HCPT处理组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)1 mg·L-1 HCPT处理组与对照组比较p16基因mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)1 mg·L-1 HCPT处理组与对照组比较Dnmt1基因mRNA表达水平降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)DNA甲基化水平检测显示HCPT处理组p16基因启动子甲基化水平较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HCPT通过降低Dnmt1基因表达水平,下调p16基因启动子甲基化水平,从而增加SLE患PBMC中p16表达水平。

• 单位
  中心实验室; 包头医学院