应用TALEN技术敲除gata4基因建立斑马鱼先天性心脏病模型

作者：刘静; 何嘉玲; 暴国; 李楠; 王天奇; 张长勇; 孙德明

来源：中国比较医学杂志, 2015, 25(04): 1-13.

• TALEN
• gata4基因
• 斑马鱼
• 模型,动物
• 先天性心脏病

目的人工构建TALEN靶向敲除载体敲除gata4基因,建立斑马鱼先天性心脏病动物模型。方法采用单元组装法构建靶向敲除gata4基因的载体,将其体外转录成TALEN mRNAs,通过显微注射的方式注入单细胞期受精卵中,胚胎检测TALEN的敲除效率,再通过剪尾、酶切、测序筛选发生基因突变的斑马鱼及突变的类型。结果酶切、测序结果证实成功构建出正确的gata4靶向敲除载体,注入斑马鱼受精卵中,发生基因敲除的效率为35.18%,通过剪尾、PCR、酶切检测成功地筛选出了发生基因突变的斑马鱼,测序结果显示出不同种类的gata4基因突变。结论成功构建gata4基因敲除的斑马鱼动物模型,为进一步研究人类gata4基因突变引起先天性心脏病的发病机制提供了良好的动物模型。

• 单位
  国家卫生计生委科学技术研究所; 北京协和医学院