塞尼卡谷病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作者：樊晓旭; 赵永刚; 迟田英; 哈登楚日亚; 吴晓东; 王志亮

来源：中国预防兽医学报, 2016, 38(12): 959-962.

• 塞尼卡谷病毒
• 荧光定量PCR
• TaqMan探针

为建立一种快速、灵敏的塞尼卡谷病毒(SVV)检测方法,本研究针对病毒基因保守区域设计了一对引物和探针,并优化反应条件,建立了检测SVV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在2.8×107拷贝/μL2.8×101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;该方法与口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应;检测灵敏度可达2.8拷贝/μL,灵敏度高于普通PCR;批内和批间的变异系数为1.73%4.00%,具有良好的稳定性。本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法可以用于SVV的检测,还可以作为诊断技术储备,应对我国未来可能出现流行的猪原发性疱疹病。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心; 内蒙古农业大学