摘要
目的探讨抑制精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)基因表达对甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)缺陷型恶性胸膜间皮瘤(MPM)细胞的联合杀伤作用。方法将MPM细胞分为MTAP阳性组(REN、H28、MPP89)和MTAP缺陷组(H2591、2452、H2052),以Hap-1 MTAP KO/WT为对照。采用PRMT5 siRNA、奎纳克林(0、0.5、1.0μmol/L)处理2组细胞,72 h后采用Western blot检测PRMT5蛋白表达水平及H4R3me2s甲基化蛋白水平。结晶紫染色法测定细胞克隆增殖能力。结果 PRMT5 siRNA可下调MTAP阳性细胞株及MTAP缺陷细胞株PRMT5蛋白水平,引起MTAP缺陷型MPM细胞的H4R3me2s甲基化水平明显下降,而对MTAP阳性细胞的H4R3me2s甲基化水平无明显抑制。PRMT5 siRNA抑制MTAP缺陷型细胞的克隆增殖能力,而对MTAP阳性细胞克隆无明显抑制作用,差异有统计学意义(P=0.023,n=3)。奎纳克林可下调MTAP缺陷型细胞系(H2591、H2052)中PRMT5蛋白质表达水平,引起H4R3me2s甲基化水平降低及细胞克隆增殖能力下降,而对MTAP阳性细胞系(MPP89)中PRMT5和H4R3me2s均无下调作用,对细胞增殖无抑制,差异有统计学意义(P=0.018,n=3)。结论抑制PMRT5能联合杀伤MTAP缺陷型MPM,奎纳克林对部分MTAP缺陷型MPM可产生联合杀伤作用。
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单位重庆市肿瘤研究所