铜绿假单胞菌重组PcrV-OprI疫苗保护小鼠骨折固定术后感染的作用

作者：张译文; 程新; 张怡; 张月月; 邹全明; 顾江^*; 肖洪; 胡仁建^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(03): 185-191.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202207117

• 铜绿假单胞菌
• PcrV
• OprI
• 开放性骨折
• 免疫保护

目的 构建髓内针固定小鼠开放性股骨骨折后铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)感染模型，评价候选PA疫苗重组PcrV-OprI的免疫保护效果。方法 采用大肠杆菌表达PcrV-OprI蛋白，依次经亲和、疏水层析纯化得到目的蛋白。C57BL/6J小鼠在第0、14、21天免疫PcrV-OprI蛋白后，使用酶联免疫吸附法检测血清中特异性IgG抗体及亚型效价。末次免疫后14 d,进行髓内针固定小鼠开放性股骨骨折术。术后PAO1菌株感染，通过比较免疫组与对照组细菌定植、体质量、组织病理学和X线影像表现等差异，评价PcrV-OprI抗原保护效果。结果 PcrV-OprI免疫组小鼠血清中特异性抗体水平显著升高(P<0.05),且以IgG1亚型为主；PcrV-OprI免疫组体质量减轻幅度显著低于对照组(P<0.05),PcrV-OprI免疫组软组织、骨内、植入物细菌数量显著低于对照组(P<0.05);PcrV-OprI免疫组炎症病理损伤小于对照组；在观察期结束时，PcrV-OprI免疫组骨折线清晰且逐渐闭合，呈愈合趋势而对照组骨折处未见明显愈合。结论 PcrV-OprI免疫能有效引起小鼠体液免疫应答，在开放性骨折髓内针固定术后PA感染模型中具有显著保护效果。

• 单位
  重庆理工大学; 中国人民解放军陆军军医大学; 生物工程学院; 第三军医大学