结核分枝杆菌肝素结合血凝素与人IL12融合基因重组耻垢分枝杆菌的构建及鉴定

作者：赵勇; 张海; 赵善民; 伍静; 毛峰峰; 郭晓雅; 张彩勤; 师长宏

来源：中国人兽共患病学报, 2011, (11): 961-965.

• HBHA
• hIL-12
• 耻垢分枝杆菌
• 重组疫苗
• 融合蛋白 HBHA
• hIL-12
• Mycobacterium smegmatis
• recombinant vaccine
• fusion protein

目的构建表达肝素结合血凝素与人IL12融合基因的重组耻垢分枝杆菌并对其进行鉴定。方法通过RT-PCR从人淋巴细胞获得hIL12基因模板,采用PCR技术克隆hIL12的P40和P35两个亚基及结核分枝杆菌的HBHA基因,通过酶切鉴定及DNA测序证实连接的基因片段均正确后,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pSMT3-HBHA-hIL12,并用电穿孔法将重组质粒转到耻垢分枝杆菌中。分别用HBHA单克隆抗体和hIL12多克隆抗体检测HBHA和hIL12蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达,并测定重组耻垢分枝杆菌生长状态的改变。结果重组耻垢分枝杆菌构建成功,通过HBHA单抗和hIL12多抗进行免疫荧光法检测证实HBH...

• 单位
  西京医院; 第四军医大学