大赖草SRAP-PCR反应体系的建立与优化

作者:代培红; 寇小霞; 吾买尔夏提·塔汉; 李月; 刘超; 周桂玲*
来源:分子植物育种, 2019, 17(17): 5735-5740.
DOI:10.13271/j.mpb.017.005735

摘要

本研究以新疆大赖草为材料,利用单因素实验和正交设计实验相结合分别研究了模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度等对大赖草SRAP-PCR体系的影响,并对扩增体系进行了优化。最后确定SRAP-PCR反应体系(25μL体系)中各因素最佳浓度为:引物0.4 mmol/L,模板DNA 30 ng/μL,dNTP 0.16 mmol/L Mg2+1.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶量1.0 U。经PCR反应体系验证和引物筛选试验表明,发现该体系适合于后续的大赖草遗传多样性研究。

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