基于下丘脑-垂体-性腺轴功能研究淫羊藿女贞子配伍对自然衰老骨质疏松大鼠的影响

作者：于萍; 马紫童; 王瀚; 李玉曼; 王秀娟^*; 刘仁慧^*

来源：中华中医药学刊, 2022, 40(10): 82-269.

DOI：10.13193/j.issn.1673-7717.2022.10.018

• 淫羊藿
• 女贞子
• 老年性骨质疏松症
• 下丘脑-垂体-性腺轴
• 成骨细胞

目的 结合体内、体外实验，研究淫羊藿女贞子配伍影响下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis, HPGA)功能防治老年性骨质疏松(senile osteoporosis, SOP)的作用机制。方法 15月龄雄性SD大鼠，随机分为4组，包括SOP组，淫羊藿组(2 g·kg-1)、女贞子组(1.5 g·kg-1)、淫羊藿女贞子配伍组(3.5 g·kg-1),每组8只，以3月龄雄性大鼠为青年对照组(青年组)。青年组适应性饲养1周后处死，其余组灌胃给予相应药物至17月龄，然后处死大鼠。取血清，酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone, GnRH)、促黄体生成激素(luteinizing hormone, LH)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone, FSH)、睾酮(testosterone, T)及雌二醇(estradiol, E2)的含量。对成骨细胞(osteoblast, OB)进行正常培养、10 ng/mL转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激和50 ng/mL肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激，并分别给予2.5%正常大鼠血清、5.0%淫羊藿含药血清、5.0%女贞子含药血清、2.5%淫羊藿女贞子含药血清，干预48 h后，采用蛋白免疫印迹法(western blot, WB)结合荧光实时定量PCR法(quantitative real time PCR,qRT-PCR)检测细胞雌激素受体(estrogen receptor, ER)ERα、ERβ和雄激素受体(androgen receptor, AR)的蛋白及mRNA表达。结果 与青年组比较，SOP组大鼠血清GnRH、T及E2的含量均显著降低，FSH的含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。与SOP组比较，配伍组大鼠血清GnRH、T及E2的含量均显著升高，LH及FSH的含量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。淫羊藿女贞子含药血清可显著上调正常培养和TNF-α刺激的OB细胞ERα、ERβ表达，及三种状态下OB细胞的AR表达，抑制TGF-β1刺激下OB细胞ERα、ERβ表达(P<0.05或P<0.01)。结论 淫羊藿女贞子配伍防治SOP的作用机制可能与改善HPGA功能有关。

• 单位
  医药学院; 首都医科大学