摘要
目的:探讨敷和备化方对CD133+HepG2肝癌干细胞Wnt/β-catenin通路的影响。方法:通过免疫磁珠法分筛出CD133+HepG2肝癌干细胞后,在干细胞培养液中诱导和培养,流式细胞术鉴定CD133+HepG2细胞比例,将CD133+HepG2肝癌干细胞分为血清对照组、空白对照组、XVV939阳性药对照组、敷和备化方组。血清对照组加入体积分数为16%正常大鼠血清培养基,空白对照组加入相同剂量正常培养基,阳性对照组加入相同剂量含1umol/L XVV939的培养基,敷和备化方组加入体积分数为16%敷和备化方含药血清培养基,药物作用6 d后采用RT-PCR以及Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关因子Wnt1、β-catenin、PI3K、AKT的mRNA以及蛋白表达。结果:与空白对照组和血清对照组相比,阳性药对照组和敷和备化方组皆可下调Wnt1、β-catenin、PI3K、AKT的mRNA水平(P<0.05),其中阳性药对照组对Wnt1、AKT的抑制力最强,敷和备化方组对β-catenin的抑制力最强;与空白对照组和血清对照组相比,阳性药对照组和敷和备化方组皆可下调Wnt1、PI3K、AKT的蛋白水平(P<0.05),敷和备化方组能明显下调β-catenin的蛋白水平(P<0.05)。结论:相较于PI3K/AKT通路,敷和备化方可以更有效下调Wnt/β-catenin通路相关因子的mRNA和蛋白表达水平,从而降低肝癌干细胞的胚系干性水平。
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单位广西中医药大学; 深圳市宝安纯中医治疗医院