艾叶提取物在减轻DOX诱导的心肌细胞损伤中的作用和机制

作者：王中晓^*; 杨峰; 张义堂; 胡清茹; 马瑜红; 曲震理

来源：免疫学杂志, 2021, 37(01): 17-25.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20210003

• 艾叶提取物
• 炎症应答
• 氧化应激
• 自噬
• 凋亡

目的探讨艾叶提取物(Artemisia argyiextract,AAE)对DOX(doxorubicin,Dox)诱导心肌细胞损伤的影响。方法选择不同剂量的艾叶提取物(0.5、1、3 g/ml)处理经DOX预处理的大鼠心肌细胞H9C2细胞,MTT法检测细胞存活率,Hoechst检测细胞凋亡,免疫荧光检测p65的入核情况,蛋白印迹法检测凋亡和自噬相关蛋白的表达以及AMPK/mTOR/ULK1通路相关蛋白磷酸化,ELISA检测炎症因子TNF-α和IL-6的水平,试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的水平。将SD大鼠分为对照组、AAE组(3 g/kg)、模型组(DOX)、DOX+AAE(0.5 g/kg)、DOX+AAE(1 g/kg)和DOX+AAE(3 g/kg)组。HE染色观察心肌病理损伤,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况,蛋白印迹法检测自噬相关LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白和自噬相关通路AMPK/mTOR/ULK1蛋白磷酸化水平,ELISA检测炎症因子TNF-α和IL-6的水平,试剂盒检测SOD、MDA和GSH-Px的水平。结果体外实验,与对照组相比,DOX组细胞存活率、SOD、GSH-Px、LC3+、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、AMPK/mTOR/ULK1通路相关蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),凋亡率、TNF-α、IL-6、p65的入核数、MDA、SQSTM1、cleaved caspase 3和cleaved caspase 9蛋白水平显著升高(P<0.05);与DOX组相比,DOX+AAE(1 g/ml)组和DOX+AAE(3 g/ml)组细胞存活率、SOD、GSH-Px、LC3+、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、AMPK/mTOR/ULK1通路相关蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05),凋亡率、TNF-α、IL-6、p65的入核数、MDA、SQSTM1、cleaved caspase 3和cleaved caspase 9表达水平显著降低(P<0.05)。体内实验与体外实验结果相一致,AAE抑制DOX诱导的大鼠心肌细胞凋亡、炎症反应、氧化应激水平,促进AMPK/mTOR/ULK1通路介导的心肌细胞自噬。结论 AAE减轻DOX诱导的心肌细胞损伤,这可能与其能抑制DOX诱导的心肌细胞凋亡、炎症反应、氧化应激水平和促进AMPK/mTOR/ULK1通路介导的心肌细胞自噬有关。

• 单位
  南阳医学高等专科学校; 南阳市中心医院